一、产品简介

293细胞专用转染试剂盒——PolyTool™ 293-Fit Transfection Reagent Kit，适用于HEK293细胞及其他HEK293细胞的高密度悬浮培养、DNA瞬时转染及蛋白表达。

PolyTool™ 293-Fit Transfection Reagent Kit适用范围：HEK293细胞悬浮培养、其他HEK293细胞的高密度悬浮培养、DNA瞬时转染及蛋白表达。

该试剂盒包括下列试剂：

（1）PolyTool™ 293 Transfection Reagent （悬浮293细胞转染试剂）；

（2）PolyTool™ 293 Medium（化学限定293 细胞无血清细胞培养液）；

（3）PolyTool™ 293 B（化学成分限定的、高浓度营养成分的补料 1）；

（4）PolyTool™ 293 C（化学成分限定的、高浓度营养成分的补料 2）。

PolyTool™ 293 Transfection Reagent 配合PolyTool™ 293 Medium、PolyTool™ 293 B及PolyTool™ 293 C使用，可大幅度提高重组蛋白的表达产量。

二、操作流程

1.细胞接种（以25mL体系为例）：

根据细胞状态，选择合适的接种密度，建议接种密度为 1×10⁶ cells/mL，待第二天细胞密度达到2×10⁶ cells/mL左右，活性大于95%时进行转染。

2.瞬时转染：

建议质粒（μg）与试剂（μL）参考配比区间为1:3~1:5之间。具体步骤如图1所示（以1:4为例）：

（1）使用本样品前涡旋混匀5秒，使用1.25 mLPolyTool™ 293 Medium稀释100 μL的转染试剂，并吹打均匀；

（2）使用1.25 mL PolyTool™ 293 Medium稀释25 μg质粒，并吹打混匀；

（3）将(1)和(2)所述溶液混合均匀；

（4）将(3)所述混合溶液室温静置孵育10~15 min；

（5）将(4)中的复合物溶液加入25 mL的细胞培养体系中，放回摇床中，在37 ℃、震荡速度120 rpm下继续培养。

3.产物表达与检测：

（1）转染24小时、72小时、120小时、168小时后加入3%（75 mL/100mL）PolyTool™293 B，0.3%（75 μL/25 mL）PolyTool™ 293 C。

（2）转染后第5~7天测定产物表达量。多数蛋白的合成在转染后第5天左右可达到最高值，客户可根据细胞状态及表达量选择适宜的收获时间。

图1 细胞转染示意图

293细胞专用转染试剂盒——PolyTool™ 293-Fit Transfection Reagent Kit代理——天津益元利康生物科技有限公司，成立于2018年，坐落于天津经济技术开发区。公司产品线涉及细胞与基因治疗、免疫学、分子生物学、细胞生物学等多个方向，专注于生命科学试剂、耗材、细胞、仪器等产品销售，经营的品牌主要有：ThermoFisher、Sigma、Qiagen、EZBioscience、ZYMO Research、MedKoo、Abcam等等。我们提供质优价美的产品、及时到位的服务，努力成长为生命科学和生物技术企业的优质供应商。