一、产品简介

CHO细胞专用转染试剂盒——PolyTool™ CHO-Fit Transfection Reagent Kit，是一款高效经济的核酸转染试剂，专门用于在CHO悬浮细胞进行重 组蛋白生产的试剂盒，包含转染试剂、稀释液、无血清培养基、补料、增强剂等组分，具有操作简单、价格便宜、 蛋白产量高等优点。

PolyTool™ CHO-Fit Transfection Reagent Kit适用范围：CHO细胞的高密度无血清悬浮培养、DNA 瞬时转染及蛋白表达。

二、实验操作流程

1.细胞接种（以25mL体系为例）：

根据细胞状态，选择合适的接种密度，建议接种密度为2.5~3×10⁶ cells/mL，待第二天细胞密度达到6×10⁶ cells/mL左右，活性大于95%时进行转染。

2.瞬时转染：

建议质粒（μg）与试剂（μL）参考配比区间为1:2~1:4之间。具体步骤如图1所示（以1:3为例）：

（1）使用本样品前涡旋混匀5秒，使用1.25 mL PolyTool™ CHO Medium稀释75 μL的转染试剂，并吹打均匀；

（2）使用1.25 mL PolyTool™ CHO Medium稀释25 μg质粒，并吹打混匀；

（3）将(1)和(2)所述溶液混合均匀；

（4）将(3)所述混合溶液室温静置孵育10~15 min；

（5）将(4)中的复合物溶液加入25 mL的细胞培养体系中，放回摇床中，在37 ℃、震荡速度120 rpm下继续培养。

3.产物表达与检测：

（1）转染24小时、72小时、120小时、168小时后加入3%（0.75 mL/25 mL）PolyTool™ CHO S1补料、0.3%（75 μL/25 mL）PolyTool™ CHO S2补料。

若想获得高表达效果，24 小时添加完补料后，将细胞转移至32℃摇床培养箱中进行低温表达（葡萄糖控制在 4~8 g/L）。

（2）转染后第 6~8 天测定产物表达量。大多数蛋白的合成在转染后第7天左右可达到最高值，客户可根据细胞状态及表达量选择适宜的收获时间。

 图1 细胞转染示意图

CHO细胞专用转染试剂盒PolyTool™ CHO-Fit Transfection Reagent Kit代理——天津益元利康生物科技有限公司，成立于2018年，坐落于天津经济技术开发区。公司产品线涉及细胞与基因治疗、免疫学、分子生物学、细胞生物学等多个方向，专注于生命科学试剂、耗材、细胞、仪器等产品销售，经营的品牌主要有：ThermoFisher、Sigma、Qiagen、EZBioscience、ZYMO Research、MedKoo、Abcam等等。我们提供质优价美的产品、及时到位的服务，努力成长为生命科学和生物技术企业的优质供应商。