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产品名称: | PEIMax转染试剂PEIMax MW40000、PEI Max MW40000,PEIMax 40K、PEI Max 40K,Polyethylenimine、线性聚乙烯亚胺、线性PEI、转染级别PEI |
规格: | 100mg,1 g, 1 ml |
贮存条件: | 避光,-20度 |
CAS号: | PEI MAX - Transfection Grade Linear Polyethylenimine Hydrochloride (MW 40,000) CAS Number: 49553-93-7 MaxFect Transfection Regent CAS Number: 49553-93-7
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物理性状: | 固体为白色或近白色粉末。 1 mg/mL水溶液透明,接近无色或略显黄色。 |
用途:
| 细胞培养级别的质粒转染。本产品仅供科研使用,不能用于临床治疗。
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PEI MW25000和PEI Max MW40000区别: | PEI MAX MW40000 ( Polysciences#24765-1)是线性化聚乙烯亚胺PEI MW25000(Polysciences#23966-1)的升级产品,是一种功能更为强大的高效瞬时转染试剂。PEI MAX MW40000与PEI 25000的区别在于: 1)wanquan水解(去乙酰化) 2)PEI 25000的盐酸盐形式,具更高的水溶特性 3)含更长连续性乙烯亚胺片段,其转染效率比PEI MW25000提高11%以上。
4)PEI MAX 40K比PEI 25K更易于使用,并且更高效。PEI 25K转染溶液通常需要几个小时才能制备,而PEI MAX 40K可以在两个小时内转化为即用型可溶性溶液。 5)PEI 25K含有4-11%的残余丙酰基,可防止聚合物主链与DNA强烈结合。PEI MAX 40K去乙酰化的结构意味着每批产品的表现始终如一,稳定性更强。 |
储存浓度:
| 1 mg/ml
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工作浓度:
| 3 ug/ml 左右,每ml培养基加入3 ul储存液。
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PEI转染试剂配置方法: | 1. 称取100mg PEI转染试剂,溶解于100ml无菌水中。配置的终浓度是1 mg/ml. 2. 缓慢使用稀盐酸,调节PH至7.0,一定不要让pH过了,一旦过了效果就不好了。 3. 使用0.1um或者0.22um无菌过滤器,过滤除菌。 4. 分装成每管500ul-1ml,-20度,保存,备用。 5. 使用超纯水配置,器具一定要灭菌干净,防止支原体污染。
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适用范围: | 本产品适用于绝大多数真核细胞质粒转染:HEK 293,293T,A549,B16F10,HeLa,Hepa 1-6,Hepa-1c1c7,HepG2,BHK-21,C2C12,C6,CHO-K1,COS-1,COS-7,Daoy,DU 145,K562,KB,LL/2(LLC1), LNCaP-FGC,MCF-7,MEL,Neuro-2a,NIH3T3,OVCAR-3,PC-3,PC-12等。
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细胞培养基: | PEI转染试剂适用于大多数常用细胞培养基,且转染前后不需要更换培养基,血清的存在不影响转染效率。
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转染时细胞密度: | 一般来说,当细胞密度达到60% - 80%时进行转染可以取得较高的转染效率。然而,不同细胞的最适转染密度都不尽相同。因此在初次转染某种细胞时,可以通过预实验先确认该细胞最佳的转染密度。
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转染质粒纯度和浓度: | 用于细胞转染的DNA应具有较高的纯度,且无内毒素残留(推荐使用无内毒素质粒大提试剂盒进行质粒抽提)。质粒浓度尽量高一些,建议大于500 ng/ul.
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转染比例: | DNA:PEI = 1:3 1ml细胞培养液,建议使用1 ug-3 ug DNA 和3 ul - 9 ul PEI转染试剂储存液。具体根据细胞情况自由调整。
在初次转染某种细胞时,推荐PEI和DNA的比例为2:1,即1 μg DNA使用2 μl PEI。转染1 μg DNA所使用的PEI转染试剂剂量可以在1 - 5 μl之间进行调整以获得最佳的转染效率。 |
转染后细胞培养时间: | 对于绝大多数细胞实验而言培养24 - 48 h即可,如实验情况特殊可在12 - 72 h之间进行优化。 |
