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HyClone血清沉淀处理与使用建议
更新时间:2025-04-08      阅读:151

以下是针对 HyClone 胎牛血清 的沉淀处理与使用建议的详细指南,帮助您高效解决问题并确保实验稳定性:

一、HyClone血清沉淀的常见类型与判断

沉淀类型

特征

是否影响实验

纤维蛋白絮状物

白色絮状或丝状漂浮物,37°C可溶解

通常不影响,过滤后可用

磷酸钙结晶

显微镜下可见细微颗粒,解冻后浑浊

可能干扰光学检测,建议过滤

变性蛋白/脂质

黄色浑浊或块状沉淀,37°C不溶解

可能影响细胞活性,建议停用


二、HyClone血清沉淀处理步骤

1. 常规处理方法(适用于正常沉淀)

 解冻与溶解:

将血清从-20°C转移至 4°C冰箱过夜缓慢解冻(避免高温快速解冻)。

若需快速解冻,可置于 37°C水浴,每隔5分钟轻轻摇晃,总时间不超过30分钟。 

混匀与静置:

解冻后轻柔摇匀,避免剧烈震荡(防止脂蛋白氧化)。

若有少量絮状物,将血清在 4°C静置1-2小时,沉淀会沉至管底。

分装上清:

用无菌移液管小心吸取上清液,避免触及底部沉淀。

剩余含沉淀的血清可丢弃或单独标记备用(如非敏感实验)。

2. 过滤处理(针对顽固或敏感实验) 

适用场景:干细胞培养、病毒生产、荧光检测等对纯度要求高的实验。

操作步骤:

使用 0.22μm孔径无菌滤膜(推荐低蛋白吸附材质,如PES膜)。

在超净台中将血清通过滤器缓慢过滤至新无菌管中。

过滤后分装,立即冻存。

3. 异常沉淀处理(疑似变质)

特征:沉淀无法溶解、血清变色(发红/发黑)、浑浊或有异味。

【操作】

立即停止使用,记录批号并拍照留存。

联系供应商(如Cytiva或授权经销商)提供质检报告或退换货。

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三、HyClone血清使用建议与预防措施

1. 分装与储存

分装体积:按实验需求分装为 10ml/管或50ml/管(减少反复冻融次数)。

冻存条件:-20°C保存(避免-80°Cjiduan温可能增加沉淀风险)。

开封后保存:

4°C短期存放不超过 1个月,使用时避免频繁取出回温。

长期未用完建议重新分装冻存。

2. 解冻与混匀技巧

推荐方法:

4°C过夜解冻 室温平衡15分钟 轻柔旋转混匀。

避免操作:

高温水浴超过30分钟(加速蛋白变性)。

剧烈震荡或涡旋(导致脂质氧化和泡沫生成)。

3. 沉淀预防措施

减少冻融次数:每次冻融可能析出5-10%的沉淀,建议分装后单次使用。

避免温度波动:冻存血清尽量放置于冰箱稳定区域(远离冰箱门)。

 选择低沉淀型号:

 型号(如HyClone SH30070)经过超滤处理,沉淀更少。

 γ-照射处理型号(如SV30087)可降低生物负荷,但可能略微增加沉淀。

 四、HyClone血清不同实验场景的优化建议

实验类型

推荐操作

注意事项

常规细胞培养

直接使用静置后的上清液

定期显微镜观察细胞状态

干细胞/原代细胞

必须过滤(0.22μm)或选择预过滤血清(SH30070

检测克隆形成率和分化能力

荧光定量检测

过滤后使用,避免颗粒干扰光信号

同步设置空白对照(含血清培养基)

大规模生产

使用工业级大包装(如500ml/瓶),分装前预过滤

验证批次一致性


五、HyClone血清常见问题解答

Q1:过滤会损失血清中的生长因子吗?

答:0.22μm过滤可能截留部分大分子复合物,但对多数生长因子(如EGFFGF)影响较小。若担心活性损失,可选择HyClone预过滤血清或减少过滤体积。

Q2:血清沉淀是否意味质量问题?

答:少量沉淀(尤其是纤维蛋白)是正常现象,与生产工艺相关,不代表产品失效。需结合细胞生长测试判断。

Q3:如何评估新批次血清是否适用?

答:进行 细胞增殖实验:

使用新旧批次血清平行培养细胞(如HEK293)。

 比较细胞贴壁率、倍增时间和形态。

 若差异显著,联系供应商协商更换。

六、紧急情况处理

细胞突然死亡:立即停用血清,换用已知良好的旧批次或培养基基础液维持,排查其他污染源(如支原体)。

批量沉淀问题:联系HyClone技术支持(Cytiva提交工单),提供批号、储存条件及沉淀照片。


通过以上处理与预防措施,可减少HyClone血清沉淀对实验的影响。如需特定型号的详细参数或替代方案,请提供实验具体需求!

 

HyClone血清代理——天津益元利康生物科技有限公司公司产品线涉及细胞与基因治疗、免疫学、分子生物学、细胞生物学等多个方向,专注于生命科学试剂、耗材、细胞、仪器等产品销售

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