Transwell细胞迁移实验，也称为Transwell迁移或侵袭测定实验，是一种用于细胞生物学和分子生物学的实验室技术，用于研究细胞通过多孔膜的运动。前面已经讲过实验步骤，那实验过程中需要注意些什么呢？

注意事项一

 基质胶在室温下容易凝固，铺胶过程全程需要在冰上操作。

注意事项二

 基质胶浓度也是影响细胞迁移和侵袭的因素之一，所以基质胶的浓度和稀释比例需根据供应商提供的信息和实验具体情况调整，必要时可设置预实验摸索最佳浓度和稀释比例。一般常用浓度为1mg/mL。

注意事项三

  铺胶时，尽量垂直小室底部在小室底部中间加入，可避免气泡的产生。

注意事项四

  吸出小室内未结合的基质胶时需确保移液管的尖头不会刮伤凝胶层表面。

注意事项五

 不同细胞的迁移和侵袭能力不同，可设置一系列细胞密度梯度摸索合适的细胞接种密度。

注意事项六

  小室的放置过程经常有气泡产生，一旦产生气泡，下层培养液的趋化作用就减弱甚至消失，因此需特别留心。一旦出现气泡，需将小室提起或用枪头去除，去除气泡后重新放置。

注意事项七

  接种细胞1-2小时后，可对培养板进行检查，确保没有大气泡产生。但有时会观察到有极小的汽包产生，但并不影响细胞迁移和侵袭，也可轻轻敲击孔板去除。

注意事项八 

  用PBS清洗小室时，需避物理触碰小室底部。可以准备几个无菌烧杯或培养皿，倒入适量PBS，依次涮洗，可提高效率。

注意事项九

  拍照前需适当晾干小室，水分会影响镜下视野。

小tips：

实验中会用到的PBS推荐

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