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此外,它还支持鸡胚成纤维细胞在无血清条件下的生长。 然后可以在无血清条件下进行病毒生产,无需添加白蛋白或其他补充剂。
Diploid SRM 系统由两个不同的套件组成:
1. Diploid Growth Serum-Reduced Medium (SRM) 试剂盒:一种基础培养基和 100X 生长添加剂,专为细胞扩增而设计
2. 二倍体生产无血清培养基 (SFM) 试剂盒(本页):专为病毒生产设计的基础培养基和 100X 生产补充剂
人类细胞传统上被用于制造各种疫苗,例如水痘带状疱疹、脊髓灰质炎、天花、甲型肝炎、麻疹、腮腺炎和风疹疫苗。 传统上,培养这些细胞的方法是使用含有 10% 血清的经典培养基用于生长,1-5% 人白蛋白(人源或重组)用于病毒生产。 这是疫苗生产中成本最高的两个组成部分。 Diploid SRM 系统有助于减少或消除这两种成分,同时保持高病毒滴度。
节约成本:
减少或消除血清可以显着降低疫苗生产过程的成本。 高级胎牛血清价格昂贵,价格波动大。 鉴于疫苗生产的典型成本压力,这两种经济驱动因素都使疫苗生产达到目标价格具有挑战性。 二倍体生长 SRM 减少了这种价格波动的影响,并提供了一定程度的成本一致性,这是使用大量血清的工艺所不具备的。
另外,血清需要冷冻保存。 生长培养基中 10% 的血清浓度会导致疫苗过程对冷冻储存的要求很高。 需要 1,000 L 生长培养基的过程需要冷冻储存 100 L 血清。 Diploid Growth SRM 试剂盒附带 100X 冷冻补充剂,可将冷冻储存要求降低 80%。 1,000 L 的二倍体生长 SRM 只需要 20 L 的冷冻储存:10 L 用于 FBS,10 L 用于 100X 补充剂。
白蛋白通常添加到病毒生产培养基中。 使用二倍体生产 SFM,可以在不添加任何额外添加剂的情况下以相当的滴度生产病毒。
无需适应:
Diploid SRM 系统是在考虑现有细胞库的情况下开发的。 由于需要使细胞适应新培养基,因此将疫苗过程过渡到新培养基可能具有挑战性。 对于 MRC-5 等人类细胞,由于在细胞适应和随后的细胞重新储存过程中需要增加传代,因此存在达到 Hayflick 极限的额外风险。 使用二倍体生长 SRM 试剂盒时,过渡到二倍体 SRM 系统不需要适应或重新储存细胞。 现有的血清库 cGMP 细胞可以直接在补充有 1% FBS 的二倍体生长 SRM 中解冻,从而可以简单地过渡到该培养基。
降低血清供应风险:
获得稳定的血清供应可能具有挑战性,尤其是当所需血清来自新西兰或澳大利亚等 BSE/TSE 安全区域时。 血清供应会根据多种环境(干旱、牛病)和经济(饲料成本、乳制品定价)因素而波动。 使用二倍体生长 SRM,由于血清需求减少,这种依赖性大大降低。