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Zymo 质粒中提/大提试剂盒有哪些应用?
更新时间:2024-01-03      阅读:505
  Zymo 质粒中提/大提试剂盒是用于提取质粒DNA或大分子DNA的试剂盒。下面是对其原理的详细介绍。
 
  1.細胞裂解:在质粒DNA提取过程中,首先需要将目标细胞进行裂解来释放细胞内的DNA。通常,使用裂解缓冲液和蛋白酶来破坏细胞膜和核膜,使DNA从细胞内释放出来。
 
  2.去除核酸:裂解后,样品中存在各种各样的核酸,包括基因组DNA、RNA和RNA-DNA杂交物。Zymo质粒提取试剂盒使用一种专有的高盐缓冲液,使质粒DNA高亲和性地结合到特殊的离心柱或微珠上,而其他核酸则被保留在上清液中。这种选择性结合是通过离心柱或微珠上的化学结构来实现的,这些化学结构能够与质粒DNA特异性地结合。
 
  3.洗涤:为了去除离心柱或微珠上的杂质和剩余的其他核酸,在异高盐条件下,使用洗涤缓冲液洗涤离心柱或微珠。这一步骤可以去除可能存在的蛋白质、RNA和其他非目标DNA物质。
 
  4.DNA解吸:经过洗涤后,目标质粒DNA依然附着在离心柱或微珠上,需要用低盐缓冲液来解离DNA。低盐缓冲液的作用是改变DNA与离心柱或微珠之间的相互作用,使DNA释放到提取管中。
 
  5.纯化:解吸后的DNA可能会含有一些杂质,如蛋白质和其他小分子。为了获得更纯净的DNA,可使用乙醇沉淀法或其他技术进行后续纯化。这一步骤可以去除与DNA结合的杂质,并得到高质量的质粒DNA。
 
  Zymo 质粒中提/大提试剂盒的应用:
 
  1.质粒构建:可以用于从大量细菌中高效提取质粒DNA,用于质粒构建,如基因克隆等实验。
 
  2.表达载体构建:提取的质粒DNA可以用于构建表达载体,用于蛋白质的高效表达和纯化。
 
  3.序列分析:质粒DNA可以用于进行序列分析,包括测序和同源性比对等实验。
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