Ezb DNA/RNA/组织提取试剂盒通过*裂解液热处理和蛋白酶K共同作用迅速裂解细胞释放出基因组DNA,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,从低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。
Ezb DNA/RNA/组织提取试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。
4.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,长度可达30kb-50kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应。
Ezb DNA/RNA/组织提取试剂盒注意事项:
1.所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf5415C或者类似离心机。
2.需要自备乙醇(需要准备100%/80%/60%/40%不同浓度)或者二甲苯。
3.实验前将需要的水浴先预热到37℃备用。
4.结合液CB和抑制物去除液IR中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5.洗脱液EB不含有整合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱,但应该确保批pH大于7.5,pH过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA应该保存在-20℃。DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗(10mMTris-HCl,1mMEDTA,pH8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。