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CST抗体说明书
更新时间:2025-04-18      阅读:68

一、产品概述

CST抗体以高特异性、灵敏度和稳定性著称,广泛应用于蛋白质功能研究、信号通路分析及疾病机制探索。其核心产品线包括XP®系列兔单克隆抗体(采用XMT®技术开发)和经严格验证的多克隆抗体,覆盖肿瘤标志物、磷酸化修饰蛋白、细胞周期调控因子等靶点。

CST抗体说明书

二、产品组成与规格

  1. 抗体形式

    • 液体抗体:含50%甘油缓冲液(避免冻融),直接使用无需复溶。

    • 冻干抗体:需用推荐缓冲液(如无菌水或含BSA的PBS)复溶。

  2. 包装规格

    • 常见规格:20μL、100μL、200μL、1mL。

    • 配套试剂:推荐使用CST推荐的封闭液、二抗及显色试剂(如SignalStain®系列)。

三、储存条件与有效期

  1. 储存温度

    • 未开封抗体:-20℃保存(含甘油,保持液态);偶联抗体(如HRP标记)需4℃保存。

    • 开封后抗体:建议分装后-20℃保存,避免反复冻融(注:CST不建议分装,若必须分装需确保无菌操作)。

  2. 有效期

    • 单组分抗体:以管身“Ref:"后的灌装日期为起始,通常为2年。

    • 试剂盒:以条形码标签日期为准,冻干细胞因子产品需在购买后12个月内使用。

四、使用方法

1. 实验前准备

  • 查阅说明书:确认抗体的应用范围(如WB、IHC、IF)、推荐稀释比例及种属反应性(如人、小鼠、大鼠)。

  • 样本处理

    • 细胞裂解液:推荐使用CST专用裂解缓冲液(如RIPA Buffer),加入蛋白酶/磷酸酶抑制剂。

    • 组织样本:福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)样本需按说明书进行抗原修复。

2. 推荐操作流程

  • Western Blot(WB)

    1. 上样量:20-30μg总蛋白,使用12% SDS-PAGE胶分离。

    2. 转膜:湿转法,推荐0.2μm硝酸纤维素膜(NC膜)。

    3. 封闭:5%脱脂牛奶(货号#9999)室温封闭1小时。

    4. 一抗孵育:4℃过夜(磷酸化抗体需延长反应时间)。

    5. 二抗:抗兔/鼠HRP标记二抗(货号#7074/#7076),室温孵育1小时。

  • 免疫组化(IHC)

    1. 抗原修复:推荐柠檬酸缓冲液(pH6.0)高压修复。

    2. 阻断:3% H₂O₂处理10分钟,5% BSA封闭。

    3. 显色:DAB或SignalStain®显色试剂。

五、注意事项

  1. 购买渠道

    • CST代理——天津益元利康生物科技有限公司,提供CST抗体、试剂盒等,确保正品及售后支持。

  2. 抗体分装禁忌

    • 分装可能导致浓度不均、污染或活性损失,CST不承担分装后质量问题。

  3. 实验优化建议

    • 磷酸化抗体:需严格验证样本刺激条件(如EGF处理15分钟激活Akt)。

    • 多色流式:搭配CompBeads微球调节荧光补偿,避免通道干扰。

  4. 常见问题排查

    • 无信号:检查样本中靶蛋白表达水平(参考UniProt或BioGPS数据库),确认抗体稀释比例及孵育时间。

    • 高背景:缩短封闭时间,更换封闭液(如BSA替代脱脂牛奶)。

附录:推荐配套试剂

试剂类型推荐产品(货号)应用场景
封闭液SignalStain® Blocking Buffer (#12454)WB/IHC/IF
二抗Anti-Rabbit IgG HRP (#7074)WB/IF
显色试剂SignalStain® DAB (#8059)IHC

注:更多产品信息请联系天津益元利康生物科技有限公司。

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