CST抗体以高特异性、灵敏度和稳定性著称,广泛应用于蛋白质功能研究、信号通路分析及疾病机制探索。其核心产品线包括XP®系列兔单克隆抗体(采用XMT®技术开发)和经严格验证的多克隆抗体,覆盖肿瘤标志物、磷酸化修饰蛋白、细胞周期调控因子等靶点。
抗体形式
液体抗体:含50%甘油缓冲液(避免冻融),直接使用无需复溶。
冻干抗体:需用推荐缓冲液(如无菌水或含BSA的PBS)复溶。
包装规格
常见规格:20μL、100μL、200μL、1mL。
配套试剂:推荐使用CST推荐的封闭液、二抗及显色试剂(如SignalStain®系列)。
储存温度
未开封抗体:-20℃保存(含甘油,保持液态);偶联抗体(如HRP标记)需4℃保存。
开封后抗体:建议分装后-20℃保存,避免反复冻融(注:CST不建议分装,若必须分装需确保无菌操作)。
有效期
单组分抗体:以管身“Ref:"后的灌装日期为起始,通常为2年。
试剂盒:以条形码标签日期为准,冻干细胞因子产品需在购买后12个月内使用。
查阅说明书:确认抗体的应用范围(如WB、IHC、IF)、推荐稀释比例及种属反应性(如人、小鼠、大鼠)。
样本处理:
细胞裂解液:推荐使用CST专用裂解缓冲液(如RIPA Buffer),加入蛋白酶/磷酸酶抑制剂。
组织样本:福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)样本需按说明书进行抗原修复。
Western Blot(WB)
上样量:20-30μg总蛋白,使用12% SDS-PAGE胶分离。
转膜:湿转法,推荐0.2μm硝酸纤维素膜(NC膜)。
封闭:5%脱脂牛奶(货号#9999)室温封闭1小时。
一抗孵育:4℃过夜(磷酸化抗体需延长反应时间)。
二抗:抗兔/鼠HRP标记二抗(货号#7074/#7076),室温孵育1小时。
免疫组化(IHC)
抗原修复:推荐柠檬酸缓冲液(pH6.0)高压修复。
阻断:3% H₂O₂处理10分钟,5% BSA封闭。
显色:DAB或SignalStain®显色试剂。
购买渠道
CST代理——天津益元利康生物科技有限公司,提供CST抗体、试剂盒等,确保正品及售后支持。
抗体分装禁忌
分装可能导致浓度不均、污染或活性损失,CST不承担分装后质量问题。
实验优化建议
磷酸化抗体:需严格验证样本刺激条件(如EGF处理15分钟激活Akt)。
多色流式:搭配CompBeads微球调节荧光补偿,避免通道干扰。
常见问题排查
无信号:检查样本中靶蛋白表达水平(参考UniProt或BioGPS数据库),确认抗体稀释比例及孵育时间。
高背景:缩短封闭时间,更换封闭液(如BSA替代脱脂牛奶)。
试剂类型 | 推荐产品(货号) | 应用场景 |
---|---|---|
封闭液 | SignalStain® Blocking Buffer (#12454) | WB/IHC/IF |
二抗 | Anti-Rabbit IgG HRP (#7074) | WB/IF |
显色试剂 | SignalStain® DAB (#8059) | IHC |
注:更多产品信息请联系天津益元利康生物科技有限公司。