以下是美天旎(Miltenyi Biotec)MACS组织保存液(假设为类似产品,如 Tissue Storage Solution 或 样本保存液)的标准使用方法的详细说明,具体操作需根据实际产品名称和说明书调整:
一、产品用途
用于 新鲜组织样本的短期保存与运输,维持细胞活性及完整性,适用于后续的细胞分离(如MACS磁珠分选)、流式分析、核酸提取等实验。
二、使用步骤
1. 样本采集与处理
组织处理:
使用无菌器械快速采集目标组织(如肿瘤、淋巴结等)。
将组织切成 3-5 mm³小块(减少中心缺氧坏死)。
用预冷的 PBS或生理盐水 冲洗,去除血液和残留物。
2. 浸泡保存液
保存液体积:组织体积与保存液比例为 1:5~1:10(如1g组织需5-10ml保存液)。
操作步骤:
将组织块浸没于保存液中。
轻柔摇晃容器,确保液体充分接触组织。
密封容器,标注样本信息(名称、日期等)。
3. 保存与运输条件
温度要求:
短期保存(<24小时):2-8℃冷藏。
长期保存(>24小时):-80℃冷冻(需确认保存液是否耐冻)。
运输:使用冰盒或干冰维持低温,避免反复冻融。
4. 后续处理
解冻(如冷冻保存):
37℃水浴快速解冻(避免长时间高温)。
解冻后立即用冷PBS清洗组织2-3次,去除残留保存液。
细胞分离:
按标准流程进行组织消化(如胶原酶处理)。
使用美天旎 MACS磁珠分选试剂盒 进行目标细胞分离。
三、注意事项
保存时间限制:
冷藏保存建议 ≤72小时,超时可能影响细胞活率。
冷冻保存需验证保存液兼容性(部分含DMSO的保存液适合冻存)。
避免污染:
操作全程保持无菌条件,保存液开启后需分装,避免多次使用。
组织类型适配性:
实体器官(肝、脾)适用性高;
脂肪或纤维化组织需延长消化时间。
保存液成分:
若含蛋白酶抑制剂(如EDTA),需避免与后续消化酶冲突。
四、常见问题解答
Q1: 保存液是否可以替代细胞冻存液?
否。组织保存液主要用于短期维持活性,若需长期冻存细胞,需使用含 DMSO/FBS 的专业冻存液。
Q2: 组织保存后细胞活率下降明显?
可能原因:
保存温度波动(未严格保持2-8℃);
组织块过大导致内部缺氧坏死;
保存时间超过推荐期限。
Q3: 能否与其他品牌的磁珠分选试剂联用?
需验证兼容性,建议使用美天旎 MACS Buffer(货号130-091-221)清洗样本,避免残留保存液影响分选效率。
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