一、简石生物感受态细胞TT2001产品概述

简石TT2001酵母感受态制备与转化试剂盒基于分子生物学"膜通透性-遗传调控"双效机制开发，适用于酿酒酵母、毕赤酵母等多种真菌的高效遗传转化。通过ISO/TC276标准验证，单次反应可实现1×10⁵–1×10⁶ CFU/μg DNA的转化效率，兼容环状/线性DNA及未纯化酶切产物。

二、简石生物感受态细胞TT2001技术原理

1. 膜通透性调控

• 化学诱导法（CaCl₂/Mg²+体系）：通过低渗溶液诱导细胞膨胀，Ca²+与磷脂双分子层作用形成孔道复合物，降低膜阻抗至<5 kΩ·cm²。

• 电穿孔法（兼容选项）：施加10-16 kV/cm电场，形成瞬时孔隙（10-100 nm），Zeta电位变化促进DNA内流。

2. 遗传稳定性控制

• 酶活性平衡：转化窗口期（0-30 min）限制性内切酶活性抑制＞90%，DNA修饰酶效率提升至5.2 U/μg。

• 同步复制调控：诱导S期特异性启动子（如GAL1）激活，染色体凝集度降低40%，实现质粒高效复制。

三、简石生物感受态细胞TT2001标准化操作流程

样本制备：

1. 取OD600=0.6-0.8对数期酵母，冰上预冷15 min

2. 加入Lambda DNA酶切液检验膜完整性（合格样本DNA结合率>85%）

感受态诱导：

• 化学法：100 mM CaCl₂处理90 s（0-4℃），透射电镜显示膜流动性提升38%

• 电转法：0.2 cm电击杯1.8 kV脉冲（时间常数4.5-5.5 ms）

转化步骤：

1. DNA与细胞冰浴共孵育20 min

2. 42℃热激90 s（化学法）或直接复苏（电转法）

3. 30℃选择性培养基培养48 h

四、简石生物感受态细胞TT2001关键性能指标

5. 五、简石生物感受态细胞TT2001保存指南

• 未诱导细胞：4℃ PBS悬浮保存≤72 h

• 感受态细胞：-80℃甘油保护液保存，建议分装为50 μL/管

• 注意事项：

• 避免反复冻融（每次冻融转化效率下降15-20%）

• 运输过程需用干冰维持-60℃以下低温链

六、简石生物感受态细胞TT2001实验优化建议

• 疑难样本处理：纤维素酶预处理（5 U/mL，30 min）可提升丝状真菌转化效率

• 大质粒转化（＞15 kb）：添加100 μM DTT及5% PEG4000增强DNA稳定性

• 自动化适配：兼容Beckman Biomek i7工作站液体处理系统

简石感受态细胞代理——天津益元利康生物科技有限公司，成立于2018年，坐落于天津经济技术开发区。公司产品线涉及细胞与基因治疗、免疫学、分子生物学、细胞生物学等多个方向，专注于生命科学试剂、耗材、细胞、仪器等产品销售，经营的品牌主要有：ThermoFisher、Sigma、Qiagen、EZBioscience、ZYMO Research、MedKoo、Abcam、BioLegend等等。我们提供质优价美的产品、及时到位的服务，努力成长为生命科学和生物技术企业的优质供应商。