takara一步法RT-qPCR说明书

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takara一步法RT-qPCR说明书

更新时间：2024-12-11

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一、产品目录表

一步法RT-qPCR探针法检测试剂盒One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG)

品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）
Takara	RR600A	One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix	200 Rxns	详询
Takara	RR600B (A × 5)	One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix	200 Rxns × 5	详询
Takara	RR601A	One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix, with UNG	200 Rxns	详询
Takara	RR601B (A × 5)	One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix, with UNG	200 Rxns × 5	详询

二、产品特点

· wan全premix型、操作简单、probe法One Step RT-qPCR。
· zuo越的抗反应阻碍物能力、粗提样品可以使用本产品
· 新增UNG版本，可防止假阳性产生

■ 制品内容

One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix (Code No.: RR600A，200次，25 μl反应体系)

1. One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix（2×）	625 μl × 4
2. RNase Free Water	1.25 ml × 2
3. ROX Reference Dye（50×conc.）*	100 μl
4. ROX Reference Dye II（50×conc.）*	100 μl

One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix with UNG (Code No.: RR601A，200次，25 μl反应体系)
1. One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix, with UNG（2×）	625 μl × 4
2. RNase Free Water	1.25 ml × 2
3. ROX Reference Dye（50×conc.）*	100 μl
4. ROX Reference Dye II（50×conc.）*	100 μl

* 使用Applied Biosystems Real-Time PCR仪器等，需要进行孔与孔之间的荧光信号校正时添加该试剂。

◆ 需要使用ROX Reference Dye (50×) 校正的仪器 Applied Biosystems 7900HT/7300 Real-Time PCR System StepOnePlus Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific) ◆ 需要使用ROX Reference Dye II (50×) 校正的仪器 Applied Biosystems 7500/7500 Fast Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific) ◆ 不需要使用ROX Reference Dye校正的仪器 Thermal Cycler Dice Real Time System系列 LightCycler/LightCycler 480 system (Roche Diagnostics) CFX96 Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad)

■ 制品说明

反应阻害物耐受实验

图1．阻害物耐受实验

在反应液中添加5种反应阻害物，分别使用One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix、Takara以往产品及其他公司的产品进行阻害物质耐受实验。结果表明，使用One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix对添加各种阻害物质和无添加组比较，Ct值之间的差值很小，显示该制品对于各种阻害物具有很高的耐受性。

target	Human ACTB基因
探针	Takara qPCR Probe

图2．Multiplex反应的再现性

以Human HeLa Cell Total RNA 1 pg～100 ng为模板，使用One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix对ACTB、GAPDH、PPIA、YWHAZ基因进行multiplex表达分析。对于所有目标序列，满足R2＞0.99。

Standard

- Actin E = 97.1％ R2= 0.996 Slope=-3.393 y-int=33.278

- YWHAZ E = 95.6％ R2= 0.997 Slope=-3.433 y-int=35.528

- GAPDH E = 100.6％ R2= 1.000 Slope=-3.307 y-int=35.400

- PPIA E = 97.1％ R2= 0.999 Slope=-3.395 y-int=33.800

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