一、细胞活力检测CCK8法实验步骤
1.取生长状态良好的细胞,调整细胞密度,按每孔100 μL细胞悬液接种于96孔板中,同时设空白孔(不加细胞但是加入同体积的培养基)。
注:通常细胞增殖实验每孔加入100 μL约含2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100 μL约含5000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。
2.根据实验设计对细胞进行培养和处理。
3.每孔加入10 μL的CCK-8溶液。继续孵育1~4 h。
注:CCK-8孵育条件与细胞培养条件相同。
4. 用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。
二、细胞活力检测CCK8法结果计算
细胞存活率(%)
=(ODsample−ODblank)/(ODcontrol−ODblank)×100%
抑制率(%)
=(ODcontrol−ODsample)/(ODcontrol−ODblank)×100%
[注]: ODsample:实验孔的OD值
ODcontrol:对照孔的 OD 值
ODblank:空白孔的OD值
三、产品推荐
Elabscience增强型细胞活力检测试剂盒(CCK-8)(E-CK-A362)
产品英文名称:Enhanced Cell Counting Kit 8 (WST-8/CCK8)
货号:E-CK-A362
规格:500Tests、100Tests、500Tests×20
检测原理:WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),在电子载体存在的情况下,WST-8被线粒体内的脱氢酶还原生成水溶性的橙黄色formazan,生成的formazan的量与活细胞数量成正比,通过检测在450 nm处的吸光度,可以间接计算活细胞的量。
检测方法:比色法
样本类型:细胞
检测仪器:酶标仪
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