简石琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒TD407代理——天津益元利康生物科技有限公司。
一、产品优点:
1. 从琼脂糖凝胶中快速(15分钟)高产量地回收超纯的DNA;
2. 特制的微量柱设计使得DNA可以在高浓度下洗脱到最小体积(≥10 µl);
3. 洗脱的DNA非常适合用于DNA连接、测序、标记、PCR等应用。
二、操作使用:
(以下离心操作步骤的离心力均在10,000 - 16,000 x g之间进行)
简石DNA回收试剂盒操作步骤一:
使用刀片或手术刀把DNA片段从琼脂糖凝胶上切除下来并且移置到 1.5 ml 小型离心管内。注意: 从凝胶上切下的琼脂糖尽可能的要少。
简石DNA回收试剂盒操作步骤二:
将3倍体积的ADB溶胶液 添加到每1体积从凝胶上切下的琼脂糖切块中。例如: 对于100 µl (mg) 的琼脂糖凝胶切块,添加300 µl的ADB缓冲液。
简石DNA回收试剂盒操作步骤三:
在37-55℃下温水浴10分钟直到凝胶切块完quan溶解。注意:确定凝胶切块完quan溶解是很重要的步骤,在温水浴过程中可辅以温和的搅拌有助于凝胶的溶解。如果DNA大小超过8kb,加热之后需要额外添加等量胶块体积的水。 例如:100 µl (mg) 的琼脂糖凝胶切块,添加300 µl的ADB缓冲液,加热之后添加100µl的水。
简石DNA回收试剂盒操作步骤四:
溶解的琼脂糖切块溶液放到1号C中并把柱套在收集管里。
简石DNA回收试剂盒操作步骤五:
离心1分钟后,倒掉过滤液。注意:柱所能容纳的样品体积为800 µl,所以,如果样品体积超过800 µl时,柱就要被多次填充和离心。
简石DNA回收试剂盒操作步骤六:
添加200µl的DNA洗涤液到柱中离心1分钟,去除滤出液。
简石DNA回收试剂盒操作步骤七:
重复第6步洗涤步骤。
简石DNA回收试剂盒操作步骤八:
可选步骤:将收集管中的废液倒掉,并将1号C套回收集管中额外离心2分钟,尽量除去洗涤液,以免洗涤液中残留乙醇抑制下游反应。
简石DNA回收试剂盒操作步骤九:
直接添加10 µl DNA洗脱液到柱基质中,将柱套在1.5 ml离心管中离心1分钟来洗脱DNA。注意:从柱中洗脱出的DNA产量与pH和温度有关。如果使用水来洗脱,确保pH是 >6.0。在向柱中加入水后静置1分钟可增加较大 (> 6 kb) DNA 的产量。在60-70℃的水中洗脱DNA可增加较大DNA (> 10 kb)的产量。
注意:如果试验需要的话,TE缓冲液 (10mMTris-HCl ,1mM EDTA,pH8.0) 或改进的TE(10mM Tris-HCl,0.1mMEDTA,pH8.5) 也可用来洗脱。
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