细胞培养是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下，使其生长繁殖，并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物可以是单个细胞，也可以是细胞系。细胞复苏是细胞培养的重要环节，下面让我们一起来看看细胞实验的常见问题都有哪些吧！
 

　　1.如何选用细胞系培养基？
 

　　优先根据细胞来源公司提供的培养条件，其次参考ATCC推荐细胞对应培养基。一般建议不要随意更换培养基种类。细胞株均有其特定使用且已适应的细胞培养基，若骤然使用与原先提供的培养条件不同的培养基，可能造成细胞形态发生变化或无法存活，以及细胞的表型功能丢失。
 

　　2.为何培养基用一段时间后，颜色偏紫？
 

　　培养基随着多次开盖会使培养液CO2 逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性从而变紫，尤其是剩余的培养基越少越容易变紫。可将培养瓶瓶盖旋松放入二氧化碳培养箱校正溶液PH值，过一段时间就会变回正常。变紫的培养基是可以继续使用的，培养细胞时在培养箱会自动恢复颜色。
 

　　3.细胞培养液变黄变浑，如何处理？
 

　　细胞培养液变黄多半是细胞密度过大，细胞增殖速度过快，产生大量酸性代谢废物，导致细胞营养不足。而培养液变浑多半是发生了细菌污染。出现这种情况应立即进行消化传代处理。
 

　　4.血清中出现的沉淀是什么，有影响吗？
 

　　①纤维蛋白，是经常出现的较大沉淀物，可达到1-2mm，用肉眼可观察到；
 

　　②胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质，是血清出现沉淀物的常见原因；
 

　　③磷酸钙，也是一种常见沉淀物，通常会使血清出现浑浊，并且在37℃培养时会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点，这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动，因此经常被误认为是微生物污染。
 

　　5.细胞何时换液最佳？
 

　　①细胞消化传代后，建议隔天或隔两天换一次液；
 

　　②细胞传代后，发现碎片多、死细胞多，在细胞形态已经形成的前提下可第二天换液；
 

　　③对于生长速度较慢的细胞，可多放点培养基，减少换液次数，让细胞静养；
 

　　④细胞传代后，细胞分布不均、细胞堆叠、细胞间隙大、局部密度大，这些情况下不用换液，可采取消化重铺的方式。
 

　　7.细胞支原体污染如何处理？
 

　　支原体污染是比较难去除的，特别容易复发，一般建议直接更换新的细胞，如特别精贵或重要的细胞可尝试使用四环素、大环内酯类抗生素(泰乐霉素)、喹诺酮类抗生素。
 

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