polyplus转染试剂 jetPRIME®应用

polyplus转染试剂 jetPRIME®是一种功能强大、用途广泛的DNA和siRNA转染试剂，用于日常实验，可产生高效可靠的科学结果。jetPRIME®确保在各种粘附细胞中具有高的DNA转染效率和优异的基因沉默。jetPRIME®也是DNA/siRNA共转染或几种质粒共递送的理想选择。此外，jetPRIME®试剂对细胞非常温和，因为它在转染过程中需要少量的试剂和核酸。

polyplus转染试剂 jetPRIME®应用方向多样，主要的应用方向如下：

一、质粒转染

jetPRIME®导致不同来源的转染粘附细胞系以及原代细胞的百分比非常高，如下表：

细胞类型	细胞系	描述	转染效率
上皮细胞	B16-F10	小鼠黑色素瘤	70-80%
	BNL-CI2	小鼠正常胚胎肝细胞	50-60%
	CaCO2	人结肠癌上皮	20%
	CHO-K1	中国仓鼠卵巢	70%
	HCT-116	人结肠癌	70%
	Hela	人宫颈上皮样癌	70-90%
	Hepg2	人肝癌	50-70%
	Huh-7	人肝癌	30-50%
	MCF-7	人乳腺腺癌	50%
	MCF-10A	人乳腺腺癌	40-50%
	MDCK	犬肾上皮	20%
	PC-3	人类前列腺癌	70%
	Vero	非洲绿猴肾	50%
成纤维细胞	COS-7	非洲绿猴肾	60-80%
	HEK-293	人胚肾成纤维细胞	80-90%
	MRC-5	人胚肺成纤维细胞	50%
	NIH-373	小鼠胚胎成纤维细胞	50-70%
成髓细胞	Raw 264.7	小鼠单核巨噬细胞	40-50%
成肌细胞	C2C12	鼠成肌细胞	70-90%
神经元	SH-SY5Y	人类神经母细胞瘤	70-80%
原发性肝细胞		人原代肝细胞	20-30%
原发性黑色素细胞		人原代黑素细胞	40-50%

表1：使用jetPRIME®的各种细胞类型的转染效率。转染后24小时通过FACS分析测定GFP阳性细胞的百分比。

质粒是常见于细菌中的环状DNA小分子。质粒与染色体DNA分开存在和复制，在细菌中，质粒通常携带有利于细菌生存的基因。质粒可以被有意地引入所需的细胞中，并用于在特定细胞系中过表达感兴趣的基因。这一过程被称为DNA转染，是研究感兴趣的基因功能或蛋白质的常用方法。

二、基因编辑

CRISPR/Cas9系统在哺乳动物细胞中的使用最近已经成为在特定基因座修饰细胞基因组的一种非常方便的方法。它涉及将（a）编码Cas9的一个或多个质粒、特异性gRNA和最终要插入的序列，或（b）一个或两个质粒和RNA分子（gRNA）的混合物瞬时转染到哺乳动物细胞中。

三、siRNA转染

jetPRIME®可使多种细胞系的内源性基因表达降低90%以上。例如，jetPRIME®介导的用靶向HeLa细胞中内源性层粘连蛋白A/C的10nM siRNA双链体转染HeLa细胞，将层粘连蛋白/C基因表达显著降低到几乎无法检测的水平。

图1：使用jetPRIME®的内源性层粘连蛋白A/C沉默。用10nM的21-mer层粘连蛋白A/C siRNA转染HeLa细胞。48小时后，使用抗层粘连蛋白A/C的抗体通过免疫荧光显微镜评估层粘连蛋白/C沉默。

四、不同核酸的共转染

jetPRIME®非常适合DNA和siRNA/miRNA共转染实验或几种DNA质粒的共递送，用jetPRIME®进行了DNA和siRNA递

送，并在各种毒性极低的细胞系中观察到高效的基因沉默。使用10nM的siRNA，在贴壁细胞中实现了超过90%的沉默（图2）。

图2：使用jetPRIME®进行DNA和siRNA共转染后，几种细胞系中的外源性萤光素酶沉默。在6孔板中用每孔400ng p4CMV Luc和10nM荧光素酶siRNA进行实验。

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